Novoprotein mRNA疫苗與藥物

報告基因mRNA再添一員-mCherry mRNA

報告基因mRNA再添一員-mCherry mRNA

Novoprotein  2023-06-15 18:42 發表於上海

螢光蛋白是一種生命科學領域必不可少的光學成像工具,螢光蛋白可以被用來進行活細胞成像,運用螢光蛋白可以標記蛋白的表達,有些蛋白質組學的實驗也可以通過利用螢光蛋白來實現,綠色螢光蛋白(green fluorescent protein, GFP)、紅色螢光蛋白(red fluorescent protein, RFP)、橙色螢光蛋白(orange fluorescent protein, OFP)是目前比較常用的螢光蛋白,這些螢光蛋白被廣泛的應用到細胞成像中。

1999年紅色螢光蛋白首次被報導,以其能夠與GFP共同使用,解決一些GFP單獨解決不了的科學問題,同時因其激發和發射波長更長,在細胞內成像時背景低等優點,受到廣大科研工作者的青睞。mCherry是一種紅色螢光蛋白的變種,來自於mushroom coral的紅色螢光蛋白,被廣泛用於生物技術作為示蹤劑的紅色螢光染料,包括分子的標記和細胞組分的定位等。表現出卓越的螢光亮度及光穩定型,以及更低的細胞毒性。

Novoprotein推出的mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) (目錄號:MR105)是一種編碼紅色螢光蛋白的報告mRNA,其最大激發光和發射光分別為587nm和610nm。通過引入N1-Me-Pseudo UTP替換天然UTP,有效降低mRNA在哺乳動物細胞中的自身免疫原性,增強mRNA的穩定性。同時模擬具有5'Cap 1結構和3'poly(A)尾巴的成熟mRNA,是使用各種測定法研究轉染和表達的理想工具。


圖1. Novoprotein mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)結構,mRNA長度為1195nt,所有UTP均替換為N1-Me-Pseudo UTP


產品純度高


圖2 瓊脂糖凝膠電泳及毛細管電泳雙重檢測,保證產品純度及完整性


圖3 LC-MS結果顯示,mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) Cap0+Cap1的加帽率達到96.58%


螢光表達活性高

將mCherry mRNA轉染至HEK 293T細胞中,轉染24h/96h後通過流式細胞儀和螢光成像儀檢測轉染效率及表達情況。


圖4 mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)轉染細胞24小時成功表達,96小時表達依然明顯
 

報告基因在靶基因的表達研究,和遞送研究中發揮著重要作用。Novoprotein成品報告基因mCherry mRNA具有螢光亮度高,螢光穩定性強的特點,此外為了滿足廣大客戶的科研需求,Novoprotein還提供eGFP mRNA、eGFP circRNA、Firefly Luciferase mRNA等成品RNA,Novoprotein成品報告基因circRNA及mRNA表達效率高,無RNA酶殘留,受到廣大核酸疫苗藥物研究客戶的青睞。


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