兩款RSV疫苗大賣12億美元，全流程解決方案協助疫苗研發進程
Novoprotein 2023-11-09 13:26 發表於浙江
目前，全球核准的RSV疫苗為GSK的RSV疫苗Arexvy和輝瑞的RSV疫苗Abrysvo。GSK最新公佈的三季數據顯示，Arexvy大賣7.09億歐元。輝瑞的RSV疫苗Abrysvo成為該公司成長最快的品種，首季銷售3.75億美元，大大超越市場預期。海外RSV市場的火爆，進一步點燃了國內外企業開發重組次單位疫苗和mRNA疫苗的熱情。 Novoprotein以創新的蛋白質原料和完善的服務為基礎，為RSV重組次單位疫苗和mRNA疫苗研發提供全流程解決方案。
RSV是一種高度流行的、傳染性很強的呼吸道病毒，是導致支氣管炎和肺炎的主要原因，兒童、老年人易受感染。每年，RSV導致近6萬名兒童死亡。僅在美國，RSV每年導致1.4萬老年人死亡[1] 。中國需RSV預防人數近4億，高風險老年罹病人數約500萬人。
RSV蛋白結構
RSV是一種包膜病毒，編碼11種蛋白質，包括非結構蛋白NS1和NS2、核蛋白N、黏附糖蛋白G和融合蛋白F等，其中G蛋白和F蛋白是RSV的兩個主要保護性抗原[2]。
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圖1 呼吸道合胞病毒結構示意圖[2]
F蛋白在RSV株中高度保守，使其成為一個很好的潛在疫苗標靶。F蛋白以三聚體形式存在，有兩種構象，融合前Pre-F和融合後Post-F，Pre-F雖然穩定性較差，但免疫原性較強。目前在Pre-F中已鑑定出7種抗原表位(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ø和Quaternary -Dependent)，以及可以和不同表位結合的抗體[3,4 ]。
1. RSV重組次單位疫苗
1.1 早期研發
針對早期研發，Novoprotein可為候選分子設計、篩選及優化、免疫原性評估提供相關服務及產品。從免疫原性預測、病原體亞型覆蓋、蛋白質結構改造、多聯多價設計等角度，進行候選分子設計工作。除提供高通量抗原表現服務外，Novoprotein還為各種篩選實驗提供RSV Pre-F和G蛋白、RSV Pre-F抗體（結合抗原決定基Ø）、RSV F抗體（結合抗原決定位I或II或III或Quaternary）、螢光標記Pre-F抗體、螢光標記F抗體、G蛋白抗體、RSV Pre-F ELISA kit、中和抗體對照品等。
1.2 CMC生產在疫苗生產製程階段，Novoprotein可提供表達細胞株建構、工業菌株建構、發酵及純化製程開發等服務及GMP級全能核酸酶。
1.3 CMC品質控制在疫苗的生產與品管過程中，Novoprotein提供FDA DMF備案的GMP級全能核酸酶BenzoNuclease ®（目錄編號：GMP-1707）及搭配酵素殘留檢測試劑盒（目錄編號：PA018），高效去除核酸殘留。
試劑盒及數位PCR預混液，多種檢測試劑可供選擇。1.4 體外藥效評估在疫苗的體外藥效評估階段，Novoprotein可提供生物活性驗證（細胞、小動物）、細胞與體液免疫評估相關抗原、抗體、試劑盒。
| 目錄號 | 產品名稱 | 應用 |
| DA101 | RSV Pre-F Antibody (3C12), Epitope Φ | 用於抗原評價，ELISA、F Low驗證 |
| DA091 | RSV F Antibody (11A9), Epitope II | 用於抗原評價，ELISA、WB、FLow驗證 |
| DA102 | RSV F Antibody (4D5), Epitope I | 用於抗原評價，ELISA驗證 |
| DA092 | RSV G Antibody (2G7) | |
| / | RSV Pre-F ELISA kit | 用於抗原評價 |
| DA101FL | FITC RSV Pre-F Antibody (3C12), Epitope Φ | 用於抗原評價，FLow驗證 |
| DA091FL | FITC RSV F Antibody (11A9), Epitope II | |
| / | 中和抗體對照品 | 對照 |
| DRA230 | RSV Prefusion F-trimer Protein (strain A2) | 抗原標準品，ELISA驗證 |
| DRA231 | RSV G Protein (strain A2) | |
| GMP-1707 | BenzoNuclease ® , GMP Grade | 去核酸殘留 |
| PA018 | BenzoNuclease ® ELISA Kit | 酵素殘留檢測 |
2. RSV mRNA疫苗
2.1 早期研發
1) 抗原/mRNA序列設計服務
基於上萬種蛋白設計經驗及文庫優勢，Novoprotein可進行抗原設計，亦可對mRNA的UTR、密碼子、Poly(A)尾、IRES序列優化等進行序列優化。
| 產品 | 服務 |
| RSV抗原/RSV檢測抗體 | 高通量基因合成 |
| 細胞免疫（RSV抗原） | 高通量質粒製備 |
| 體液免疫評估（RSV抗原） | 高通量mRNA製備 |
| 質粒製備用PCR/克隆試劑 | 高通量LNP包封 |
| 兔多抗製備 | |
| 免疫效價檢測 |
2.2 CMC生產
Novoprotein提供mRNA合成及修飾用原料酵素及試劑。所有產品均採用藥用規格原輔料生產，符合GMP規範的產品生產與品質管理規程，並保障生產過程及所有原輔料可追溯。
產品特點：
- 為客戶提供全套的原料放行方案，全套酵素產品已完成FDA DMF申報備案，並通過HALAL清真認證
- GMP級生產管理體系，設計50億人份產能
- 100餘家國內外客戶的信任之選，其中2家客戶產品獲國內外EUA
| 質粒線性化 | 體外轉錄 | 加帽修飾 | 加尾修飾 |
| BsaI | T7 RNA Polymerase | Vaccinia Capping Enzyme | E.coli Poly(A) Polymerase |
| BspQI | RNase Inhibitor | 2´-O-Methyltransferase | |
| XbaI | Pyrophosphatase, Inorganic (yeast) | SAM | |
| T7 RNA Transcription Enzyme Mix | |||
| NTPs | |||
| N1-Me-pUTP/pUTP | |||
| CAP1 GAG/CAP1 GAG(3'OMe) |
2.3 CMC品質控制
| 產品 | 服務 |
| 加帽率檢測樣品處理試劑盒 (CD002) | 完整性/加帽速率/加尾檢測 |
| RNase H(E134) / RNase T1(E151) / Oligo(dT)磁珠 | dsRNA/DNA等殘留檢測 |
| 原料酵素(PA101)/DNase/ RNase殘留檢測試劑盒(DT007-R40) | 包封率/粒徑/zeta電位檢測 |
| E.coli DNA 殘留檢測試劑盒/相容數位PCR平台qPCR Mix(E406) |
2.4 體外藥效評估
在疫苗的體外藥效評估階段，Novoprotein可提供生物活性驗證（細胞、小動物）、細胞與體液免疫評估相關抗原、抗體、試劑盒及對照用mRNA。
對照用報告基因
| eGFP mRNA | Luciferase mRNA | mCherry mRNA |
| eGFP circRNA | Luciferase circRNA |
基於高品質原料與成熟的技術平台，Novoprotein可為SARS-CoV-2、Influenza A/B、RSV、VZV、RABV、MPXV、HSV、ASFV、PEDV、PRV、PRRSV等人與動物的創新疫苗研發與製程研究提供解決方案，歡迎諮詢。
參考文獻
1. https://www.niaid.nih.gov/diseases-conditions/respiratory-syncytial-virus-rsv
2. Nam HH, Ison MG. Respiratory syncytial virus infection in adults. BMJ. 2019 Sep 10;366:l5021.
3. Gilman MS, et al. Characterization of a Prefusion-Specific Antibody That Recognizes a Quaternary, Cleavage-Dependent Epitope on the RSV Fusion Glycoprotein. PLoS Pathog. 2015 Jul 10;11(7):e105035.
4. McLellan JS, et al. Graham BS. Structure of RSV fusion glycoprotein trimer bound to a prefusion-specific neutralizing antibody. Science. 2013 May 31;340(6136):1113-7.