mRNA原液品質控制－為疫苗研發保駕護航

Novoprotein在全套GMP原料酶的基礎上，不斷探索mRNA合成及品質管制方法與工藝，並發展出系列相關檢測用試劑盒。
為滿足mRNA疫苗企業的原液檢測需求，Novoprotein特全新推出dsRNA ELISA Kit，可配對檢測mRNA原液中dsRNA的含量狀況，解決原液質檢問題。本試劑盒以雙抗體夾心酵素連結免疫法（ELISA）檢測dsRNA, 可以高靈敏、特異性地檢測和定量分析mRNA中的dsRNA殘留量。
產品特點
檢測時間縮短至1.5小時。
檢測線性範圍：0.024-1.5ng/ml。


無機焦磷酸酶殘留檢測試劑盒（Pyrophosphatase, Inorganic ELISA Kit，目錄編號：PA101）
在mRNA疫苗藥物的生產過程中，無機焦磷酸酶可提高mRNA產物的生成量，根據規定，需要對mRNA疫苗原液進行各項殘留檢測，其中PPase作為蛋白質屬於蛋白質殘留檢測項範疇，因此需要對其殘留量進行定量檢測。本試劑盒以雙抗體夾心酵素連結免疫法（ELISA）檢測PPase，可高靈敏度、高特異性地檢測和定量分析mRNA原液中的PPase殘留。
產品特點
檢測時間縮短至1.5小時。
靈敏度高，達0.125ng/ml。
檢測線性範圍：0.125-8ng/ml。


加帽速率檢測樣品處理完整試劑盒（mRNA Capping Detection Sample Preparation Kit 目錄編號：CD001 /CD002）
Novoprotein重磅推出磁珠法樣本處理完整試劑盒（目錄編號：CD001），涵蓋所有加帽率樣本處理所需試劑，使用者只需準備mRNA樣本即可。
經典磁珠法樣品處理流程：

產品特點
一步完成探針結合與酶切，操作簡單快速，全流程僅需1.5-2小時
特殊的裂解探針設計想法有效減少次裂解產物形成，便於後續加帽速率檢測結果分析
酶切mix穩定性強，37℃ 21天，反覆凍融150次，酶切活性無影響
 

同時，在方法論的探索中，Novoprotein永不止步，開發出創新沉澱法加帽率樣品處理試劑盒（目錄號： CD002 ），並提交了發明專利申請（申請號：202311212061X）。在這個方法中，無需生物素化探針，沉澱液取代磁珠，更低成本完成加帽率檢測樣品處理。探針與目標mRNA退火形成DNA/RNA雜交雙股後，引導RNase H在特定位置切割mRNA。再利用特殊最佳化配製的沉澱液可有效回收5'端酶切片段，操作簡單快速，處理後的樣本可直接用於LC-MS系統下的加帽率檢測。
創新沉澱法樣品處理流程：

產品特點
一步完成探針結合與酶切，操作簡單快速，全流程僅需1.5小時
無需生物素化探針和磁珠，成本更低
回收率大於80%
酶切mix穩定性強，37℃ 21天，反覆凍融150次，酶切活性無影響

mRNA加尾速率檢測伴侶－核糖核酸酶T1(RNase T1，目錄編號：E151 )
核糖核酸酶T1（RNase T1）是經由一系列純化步驟分離所得的重組蛋白，是一種核糖核酸內切酶。此酵素在鳥苷殘基位點後特異性切割單股RNA，產生3'磷酸末端。此酵素藉由形成核苷2'，3'-環磷酸中間體來切割3'-鳥苷殘基與鄰近核苷5'-OH基團之間的磷酸二酯鍵。反應產物為3'-GMP末端寡核苷酸。利用RNase T1核酸酶作用於鳥嘌呤核苷酸（G）3'端磷酸，切割鄰近核苷酸間的磷酸二酯鍵，特異性地切割單股RNA，釋放Poly(A)序列。使用oligo-dT 磁珠對樣品進行純化，純化後的樣品可進行液相層析質譜儀（LC-MS）檢測，檢測可分析其長度與組成。


RNase檢測試劑盒（RNase Detection Kit，目錄編號：DT007）
核糖核酸酶（Ribonuclease, RNase）在自然界中廣泛存在，即使是微量的RNase也會污染常見的分子生物學試劑，尤其會影響涉及RNA的相關實驗。因此，需要一種RNase殘留檢測試劑，可測試任何與RNA相關的溶液中是否有RNase殘留。
RNase Detection Kit提供一種方便且靈敏的螢光檢測方法，可用於檢測蛋白、核酸、試劑溶液等樣本中有無RNase。本試劑盒可同時檢測包括RNase A、RNase T1、RNase I、微球菌核酸酶、S1 核酸酶、綠豆核酸酶、Benzonase®全能核酸酶和RNase R在內的多種RNase。
RNase Substrate是一種新型的RNase A底物，該底物一端標記有螢光基團，另一端標記淬滅基團，淬滅基團的物理距離會將螢光基團發出的螢光抑製到極低水平。透過短波紫外線照射或在螢光計中檢測，含有RNase污染的溶液會在檢測中產生綠色螢光，而沒有RNase的溶液不會發出螢光。

紫外線條件下，可以明顯區分陰性和陽性。